CanAg CA 125 - ELISA

Le Test CanAg CA125 EIA est en phase solide. Cet immuno-test, non-compétitif, est basé sur la méthode sandwich directe.

Les Calibreurs, les Contrôles et les échantillons de Patients sont incubés ensemble avec un Anti-CA125, anticorps monoclonal (de la souris) (Mab) OV 197 biotinylé, dans des barrettes microtitre enduites à la Streptavidine. CA125, présent dans les Calibreurs ou dans les échantillons, est absorbé sur les barrettes enduites de Streptavidine par le Anti-CA125 Mab biotinylé, durant l’incubation. Les barrettes sont alors lavées et incubées avec HRP étiqueté Anti-CA125 Mab OV 185.

Après lavage le Réactif tamponné Substrat Chromogène (Hydrogène Peroxyde et 3, 3’, 5, 5’ tétra-méthyl-benzidine) est ajouté à chaque puits et la réaction enzymatique peut commencer.

Pendant la réaction enzymatique, une couleur bleue se développe si l’antigène est présent. L’intensité du développement de la couleur est proportionnelle à la quantité de CA125 présent dans les échantillons. L’intensité de la couleur est déterminée par un Spectrophotomètre pour plaque microtitre à 620 nm (ou optionnellement à 405 nm) après addition de la Solution d'Arrêt.

Les courbes de calibrage sont construites pour chaque test en mettant sous forme graphique les valeurs d’absorbance contre la concentration de chaque Calibreur. Les concentrations de CA125 des échantillons de patients sont alors lues à partir de la courbe de calibrage.